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產(chǎn)品中心

SGC-7901細(xì)胞

目錄號(hào): CL-S01

單 價(jià):¥1350

規(guī)格:
1 ml/支
數(shù)量:
-
+
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產(chǎn)品詳情介紹

來源:人源


組織來源:胃癌上皮


生長狀態(tài):貼壁


完全培養(yǎng)基:RPMI1640(Code#FI201)+10%FBS(Code#FS501)+Penicillin-Streptomycin(100×)(Code#FG101)


培養(yǎng)條件:37℃,95%潔凈空氣+5%二氧化碳


細(xì)胞復(fù)蘇:

將細(xì)胞從液氮中取出,迅速置于37℃水浴鍋中,并輕輕晃動(dòng)。待凍存的細(xì)胞融化成只有綠豆大小的冰球時(shí),迅速移至細(xì)胞工作臺(tái),將細(xì)胞移入15 ml離心管中,加入預(yù)熱的完全培養(yǎng)基3-6 ml,輕輕混勻,500-800 rpm離心5-10 min,小心地移去上清。使用3-15 ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,再輕輕的混勻細(xì)胞,接種至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。


細(xì)胞傳代:

以6孔板為例,將細(xì)胞培養(yǎng)基移去,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細(xì)胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細(xì)胞變圓且沒有細(xì)胞或僅有少量細(xì)胞脫落時(shí),使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化,輕輕的混勻細(xì)胞,傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。如果細(xì)胞狀態(tài)較差,在中止消化后,500-800 rpm離心5-10 min,去除上清,使用合適量的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,再輕輕的混勻細(xì)胞,傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。


傳代比例:1:3-1:6


傳代間隔:每2-3天傳代一次


凍存培養(yǎng)基:TransStem? Chemically Defined Xeno-free Cell Cryopreservation Medium-Protein Free(Code#MC102)


細(xì)胞凍存:

以6孔板為例,待細(xì)胞匯合度為90%左右、細(xì)胞數(shù)量為1-2×106個(gè)細(xì)胞時(shí),移去細(xì)胞培養(yǎng)基,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細(xì)胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細(xì)胞變圓且沒有細(xì)胞或僅有少量細(xì)胞脫落時(shí),使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化,輕輕的混勻細(xì)胞,500-800 rpm離心5-10 min,去除上清,使用1 ml凍存培養(yǎng)基輕輕的重懸細(xì)胞,將細(xì)胞移入凍存管中,標(biāo)記并放入4℃預(yù)冷的凍存盒中,置于-80℃,冷凍過夜。次日取出放于液氮中長期保存。



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