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HEK-293細胞

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CL-H011 ml/支1350
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產(chǎn)品詳情介紹

來源:人源


組織來源:胚胎腎


生長狀態(tài):貼壁


完全培養(yǎng)基:DMEM(Code#FI101)+10%FBS(Code#FS501)+Penicillin-Streptomycin(100×)(Code#FG101)


培養(yǎng)條件:37℃,95%潔凈空氣+5%二氧化碳


細胞復蘇:

將細胞從液氮中取出,迅速置于37℃水浴鍋中,并輕輕晃動。待凍存的細胞融化成只有綠豆大小的冰球時,迅速移至細胞工作臺,將細胞移入15 ml離心管中,加入預熱的完全培養(yǎng)基3-6ml,輕輕混勻,500-800 rpm離心5-10 min,小心地移去上清。使用3-15 ml培養(yǎng)基重懸細胞,再輕輕的混勻細胞,接種至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。


細胞傳代:

以6孔板為例,將細胞培養(yǎng)基移去,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細胞變圓且沒有細胞或僅有少量細胞脫落時,使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化,輕輕的混勻細胞,傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。如果細胞狀態(tài)較差,在中止消化后,500-800 rpm離心5-10min,去除上清,使用合適量的培養(yǎng)基重懸細胞,再輕輕的混勻細胞,傳代至合適的新培養(yǎng)介質(zhì)中。


傳代比例:1:3-1:6


傳代間隔:每2-3天傳代一次


凍存培養(yǎng)基:TransStem? Chemically Defined Xeno-free Cell Cryopreservation Medium-Protein Free(Code#MC102)


細胞凍存:

以6孔板為例,待細胞匯合度為90%左右、細胞數(shù)量為1-2×106個細胞時,移去細胞培養(yǎng)基,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養(yǎng)箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細胞變圓且沒有細胞或僅有少量細胞脫落時,使用3-6 ml完全培養(yǎng)基中止消化,輕輕的混勻細胞,500-800 rpm離心5-10 min,去除上清,使用1 ml凍存培養(yǎng)基輕輕的重懸細胞,將細胞移入凍存管中,標記并放入4℃預冷的凍存盒中,置于-80℃,冷凍過夜。次日取出放于液氮中長期保存。


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